高保真酶預(yù)混液基本信息匯總
高保真酶預(yù)混液是一種用于PCR擴(kuò)增的即用型試劑,具有高保真性、高特異性和高效性,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實驗。以下是其主要特點(diǎn)和應(yīng)用場景:
1. 主要特點(diǎn)?
高保真性?:采用高保真DNA聚合酶(如Q5、Hieff Canace®等),其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,普通Pfu DNA聚合酶的9倍,顯著降低錯配率?。
熱啟動設(shè)計?:通過單克隆抗體抑制聚合酶活性,減少非特異性擴(kuò)增,提高反應(yīng)特異性?。
長片段擴(kuò)增能力?:可擴(kuò)增長達(dá)13 kb的DNA片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增?。
即用型設(shè)計?:預(yù)混液包含dNTPs、緩沖液和染料,只需加入引物和模板即可進(jìn)行PCR,簡化實驗步驟?。
穩(wěn)定性好?:含有特異保護(hù)劑,反復(fù)凍融后仍能維持穩(wěn)定活性?。
2. 應(yīng)用場景?
基因克隆與組裝?:適用于無縫克隆、多片段DNA組裝和定點(diǎn)突變等實驗?。
二代測序(NGS)文庫制備?:優(yōu)化用于NGS文庫擴(kuò)增,提高文庫均一性和產(chǎn)量,尤其在GC富集區(qū)域表現(xiàn)優(yōu)異?。
復(fù)雜模板擴(kuò)增?:適用于高GC含量、復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板擴(kuò)增?。
高通量實驗?:適用于批量樣本處理,提高實驗效率?。
3. 常見品牌與產(chǎn)品?
NEBuilder® 高保真 DNA 組裝預(yù)混液?:用于無縫組裝多個DNA片段,無需PCR純化步驟,適合合成生物學(xué)和多片段克隆?。
NEBNext® Ultra™ II Q5® 預(yù)混液?:專為NGS文庫擴(kuò)增優(yōu)化,具有超高保真度和熱啟動特性?。
Hieff Canace® Gold PCR Master Mix?:即用型預(yù)混液,適用于長片段擴(kuò)增和高保真PCR?。
4. 選擇建議?
實驗需求?:根據(jù)實驗類型(如克隆、測序或復(fù)雜模板擴(kuò)增)選擇合適的產(chǎn)品?。
保真性要求?:對于高保真性要求的實驗,優(yōu)先選擇保真性更高的酶(如Q5或Hieff Canace®)?。
操作便捷性?:選擇即用型預(yù)混液,簡化實驗步驟,提高效率?。
高保真酶預(yù)混液憑借其高保真性、熱啟動設(shè)計和長片段擴(kuò)增能力,已成為分子生物學(xué)實驗中的工具?。
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